agxАндрология и генитальная хирургияAndrology and Genital Surgery2070-97812412-8902MedINK Publishing House LLC10.17650/2070-9781-2019-20-1-75-81agx-339Research ArticleОРИГИНАЛЬНАЯ СТАТЬЯORIGINAL REPORTОценка состояния сперматогенеза у пациентов с азооспермией или криптозооспермией с помощью метода количественного кариологического анализа незрелых половых клетокQuantitative karyological analysis of immature germ cells for the evaluation of spermatogenesis in patients with azoospermia or cryptozoospermiahttps://orcid.org/0000-0002-4618-2466СорокинаТ. М.SorokinaT. M.

115522 Москва, ул. Москворечье, 1

1 Moskvorech’e St., Moscow 115522

https://orcid.org/0000-0002-5048-5486АндрееваМ. В.AndreevaM. V.

115522 Москва, ул. Москворечье, 1

1 Moskvorech’e St., Moscow 115522

https://orcid.org/0000-0002-0580-5575ШтаутМ. И.ShtautM. I.

115522 Москва, ул. Москворечье, 1

1 Moskvorech’e St., Moscow 115522

https://orcid.org/0000-0002-7615-8512ЧерныхВ. Б.ChernykhV. B.

115522 Москва, ул. Москворечье, 1; 117437Москва, ул. Островитянова, 1

1 Moskvorech’e St., Moscow 115522; 1 Ostrovityanova St., Moscow 117437

https://orcid.org/0000-0003-3603-4838КурилоЛ. Ф.KuriloL. F.

Любовь Федоровна Курило

115522 Москва, ул. Москворечье, 1

1 Moskvorech’e St., Moscow 115522

kurilo@med-gen.ruФГБНУ Медико-генетический научный центрРоссияResearch Centre for Medical GeneticsRussian FederationФГБНУ Медико-генетический научный центр; ФГБОУ ВО «Российский национальный исследовательский медицинский университет им. Н.И. Пирогова» Минздрава РоссииРоссияResearch Centre for Medical Genetics; N.I. Pirogov Russian National Research Medical University, Ministry of Health of RussiaRussian Federation2019310320192017581Copyright © Сорокина Т.М., Андреева М.В., Штаут М.И., Черных В.Б., Курило Л.Ф., 20192019Сорокина Т.М., Андреева М.В., Штаут М.И., Черных В.Б., Курило Л.Ф.Sorokina T.M., Andreeva M.V., Shtaut M.I., Chernykh V.B., Kurilo L.F.Данная работа распространяется под лицензией Creative Commons Attribution 4.0.This work is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 License.https://agx.elpub.ru/jour/article/view/339

Цель исследования — оценить состояние сперматогенеза у пациентов с азооспермией/криптозооспермией с нормальным и сниженным объемом эякулята с помощью метода количественного кариологического анализа незрелых половых клеток из эякулята (ККА НПК).

Материалы и методы

Материалы и методы. Исследовали 72 образца эякулята пациентов с подозрением на азооспермию, из них 48 имели нормальный объем (≥1,5 мл) и 24 — сниженный (<1,5 мл). Выполнено стандартное спермиологическое исследование и ККА НПК всех образцов эякулята.

Результаты

Результаты. В 71 (98,6 %) из 72 исследованных образцов эякулята с помощью ККА НПК обнаружены сперматозоиды. В16 (33 %) образцах эякулята с нормальным объемом выявлены признаки частичного блока сперматогенеза на допахитенных стадиях, в 8 случаях сочетавшегося с блоком на стадии пахитены, а в 3 случаях — еще и на стадии диплотены. При сниженном объеме эякулята в 6 (25 %) образцах выявлены признаки частичного блока сперматогенеза на допахитенных стадиях, при этом в 1 случае сочетавшегося с блоком на стадии диплотены профазы Iмейоза.

Заключение

Заключение. Неинвазивность, относительная быстрота выполнения и возможность многократного повторения исследования без риска для здоровья пациента позволяют рекомендовать метод ККА НПК для оценки состояния сперматогенеза, в том числе в динамике. При подозрении на азооспермию выполнение ККА НПК является альтернативой диагностической биопсии яичка.

The study objective is to evaluate spermatogenesis using the method of quantitative karyological analysis of immature germ cells from the ejaculate sediment (QKAIGC) in patients with azoospermia or cryptozoospermia with normal and low semen volume.

Materials and methods

Materials and methods. Seventy-two (72) semen samples from patients with suspected azoospermia were analyzed, 48 with normal semen volume (≥1,5 ml) and 24 with low semen volume (<1,5 ml). A standard semen examination and QKA IGC were performed for all the samples.

Results

Results. By QKA IGC in 98.6 % of the samples spermatozoa were detected. In 16 (33 %) samples with normal ejaculate volume, incomplete spermatogenesis arrest at the pre-pachytene stages was revealed. It was accompanied by pachytene arrest (8 cases) and by diplotene arrest (3 cases). In samples with low ejaculate volume, 6 samples (25 %) showed signs of incomplete spermatogenesis arrest at the pre-pachytene stages; in 1 case it was accompanied by the meiotic arrest at diplotene of prophase I.

Conclusion

Conclusion. Noninvasiveness, relative rapidity and possibility of multiple repeats of the test without risks for the patients’ health allow us to recommend QKA IGC for evaluation of spermatogenesis including dynamic evaluation. For suspected azoospermia, we recommend QKA IGC as an alternative for testis diagnostic biopsy.

азооспермиякриптозооспермиямейозмужское бесплодиеполовые клеткисперматогенезэякулятazoospermiacryptozoospermiameiosismale infertilitygerm cellsspermatogenesisejaculateReferencesКурило Л.Ф. Гаметогенез человека: выявление и анализ аномалий хромосом и гамет в целом, тестирование гаметотоксического эффекта повреждающих факторов. Лабораторное дело 1989;(10):4—8.Kurilo L.F. Gametoge-nesis in humans: identification and analysis of anomalies in chromosomes and gametes as a whole, evaluation of gametotoxic effects of damaging factors. Laboratornoe delo = Laboratory Science 1989;(10):4-8. (In Russ.).Черных В.Б. AZF делеции — частая генетическая причина бесплодия у мужчин: современное состояние исследований. Проблемы репродукции 2009;15(1):10—5.Chernykh V.B. AZF deletions are common genetic cause of male infertility: the current state of research. Problemy reproduktsii = Russian Journal of Human Reproduction 2009;15(1):10—5. (In Russ.).Курило Л.Ф., Андреева М.В., Коломиец О.Л. и др. Генетические синдромы с нарушениями развития органов половой системы. Андрология и генитальная хирургия 2013;14(4): 17-27.Kurilo L.F., Andreeva M.V., Kolomiets O.L. et al. Genetically caused congenital anomalies of reproductive system. Andrologiya i genital’naya khirurgiya = Andrology and Genital Surgery 2013;14(4):17—27. (In Russ.).Гамидов С.И., Попова А.Ю., Овчинников Р.И. Необструктивная азооспермия — клинические рекомендации. Русский медицинский журнал 2015;23(11):595—601.Gamidov S.I., Popova A.Yu., Ovchinnikov R.I. Nonobstructive azoospermia — clinical recommendations. Russky meditsinsky zhurnal = Russian Medical Journal 2015;23(11):595—601. (In Russ.).Esteves S.C., Agarwal A. The azoospermic male: current knowledge and future perspectives. Clinics (Sao Paulo) 2013;68 Suppl 1: 1—4. DOI: 10.6061/clinics/2013(Sup01)01. PMID: 23503949.Esteves S.C., Agarwal A. The azoospermic male: current knowledge and future perspectives. Clinics (Sao Paulo) 2013;68 Suppl 1: 1—4. DOI: 10.6061/clinics/2013(Sup01)01. PMID: 23503949.Андрология. Мужское здоровье и дисфункция репродуктивной системы. Под ред. Э. Нишлага, Г. Бере. М.: Медицинское информационное агентство, 2005. С. 450.Andrology. Male reproductive health and dysfunction. Ed. by E. Nieschlag, H.M. Behre. Moscow: Medical information agency, 2005. P. 450.(In Russ).Jarow J.P., Espeland M.A., Lipshultz L.I. Evaluation of the azoospermic patient. J Urol 1989;142(1):62—5. PMID: 2499695.Jarow J.P., Espeland M.A., Lipshultz L.I. Evaluation of the azoospermic patient. J Urol 1989;142(1):62—5. PMID: 2499695.Руководство ВОЗ по исследованию и обработке эякулята человека. Пер. с англ. Н.П. Макарова. Науч. ред. Л.Ф. Курило. 5-е изд. М.: Капитал Принт, 2012.WHO Laboratory manual for the examination and processing of human semen. Trans. from English by N.P. Makarov. Scientific ed. by L.F. Kurilo. 5th edn. Moscow: Kapital Print, 2012. (In Russ.).Курило Л.Ф., Чеботарев А.Н., Шилейко Л.В. и др. Сравнительный анализ соотношения незрелых половых клеток на разных стадиях их дифференцировки в биоптате яичка и эякуляте у пациентов с азоо- и олигозооспермией. Проблемы репродукции 1997;3(1):80—4.Kurilo L.F., Chebotarev A.N., Shileyko L.V. et al. Comparative analysis of the ratio of immature germ cells at various stages of their differentiation in testicular biopsy material and ejaculate in patients with azoo- and oligozoospermia. Problemy reproduktsii = Russian Journal of Human Reproduction 1997;3(1):80—4. (In Russ.).Курило Л.Ф., Дубинская В.П., Остроумова Т.В. и др. Оценка сперматогенеза по незрелым половым клеткам эякулята. Проблемы репродукции 1995;(3):33—8.Kurilo L.F., Dubinskaya V.P., Ostroumova T.V. et al. Evaluation of spermatogenesis per the immature germ cells in ejaculate. Problemy reproduktsii = Russian Journal of Human Reproduction 1995;(3):33—8. (In Russ.)].Гаева Т.Н. Разработка метода количественного анализа незрелых половых клеток из эякулята и выяснение степени его информативности. Автореф. дис. ... канд. биол. наук. М., 1997. 17 с.Gaeva T.N. Development of a method of quantitative analysis of immature germ cells in the ejaculate and assessment of its informative value. Abstract of dis. ... of cand. of biol. sciences. Moscow, 1997. 17 p. (In Russ.).Гришина Е.М. Характеристика сперматогенеза при некоторых генетически обусловленных и приобретенных нарушениях репродуктивной функции у мужчин. Автореф. дис. ... канд. мед. наук. М., 2004. 30 с.Grishina E.M. Characteristics of spermatogenesis in some genetically determined and acquired disorders of reproductive function in men. Abstract of dis. ... of cand. of med. sciences. Moscow, 2004. 30 p. (In Russ.).Баранов В.С., Кузнецова Т.В. Цитогенетика эмбрионального развития человека: научно-практические аспекты. СПб.: Изд-во Н-Л, 2007. 640 с.Baranov V.S., Kuznetsova T.V. Cytogenetics of human embryonic development: scientific and practical aspects. Saint Petersburg: N-L Publishing House, 2007. 640 p. (In Russ.).Андреева М.В., Хаят С.Ш., Шилейко Л.В. и др. Количественный кариологический анализ незрелых половых клеток из эякулята как часть протокола обследования мужчин с бесплодием в браке. Андрология и генитальная хирургия 2017;18(1):62—9. DOI: 10.17650/2070-9781-2017-18-1-62-69.Andreeva M.V., Khayat S.Sh., Schileiko L.V. et al. Quantitative karyological analysis of immature germ cells from ejaculate as part of examination of patients with infertility in marriage. Andrologiya i genital’naya khirurgiya = Andrology and Genital Surgery 2017;18(1):62-9. (In Russ.). DOI: 10.17650/2070-9781-2017-18-1-62-69.Патент на изобретение № 2328736/ 10.07.2008. Бюл. № 19. Курило Л.Ф. Способ цитологической диагностики нарушения сперматогенеза.Patent RUS № 2328736/10.07.2008. Bull. № 19. Kurilo L.F. Method of cytogenetic diagnosis of spermatogenesis violation. (In Russ.). Доступно по: http://www.freepatent.ru/patents/2328736. Ссылка активна на 20.01.2019.Belker A.M., Thomas Aj. Jr, Fuchs E.F. et al. Results of 1,469 micro-surgical reversals by vasovasostomy study group. J Urol Nurs 1991;11(2):93—111. PMID: 12319282.Belker A.M., Thomas Aj. Jr, Fuchs E.F. et al. Results of 1,469 micro-surgical reversals by vasovasostomy study group. J Urol Nurs 1991;11(2):93—111. PMID: 12319282.Meacham R. From androlog. J Androl 2002;23(3):330—1. DOI: 10.1002/j.1939-4640.2002.tb02238.x. PMID: 12002433.Meacham R. From androlog. J Androl 2002;23(3):330—1. DOI: 10.1002/j.1939-4640.2002.tb02238.x. PMID: 12002433.Von Eckardstein S., Cooper T.G., Rutscha K. et al. Seminal plasma characteristics as indicators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) gene mutations in men with obstructive azoospermia. Fertil Steril 2000;73(6):1226—31. DOI: 10.1016/S0015-0282(00)00516-1. PMID: 10856487.Von Eckardstein S., Cooper T.G., Rutscha K. et al. Seminal plasma characteristics as indicators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR) gene mutations in men with obstructive azoospermia. Fertil Steril 2000;73(6):1226—31. DOI: 10.1016/S0015-0282(00)00516-1. PMID: 10856487.De la Taille A, Rigot J.M., Mahe P. et al. [Correlation of genitourinary abnormalities, spermiogram and CFTR genotype in patients with bilateral agenesis of the vas deferens (In French)]. Prog Urol 1998;8(3):370—6.De la Taille A, Rigot J.M., Mahe P. et al. [Correlation of genitourinary abnormalities, spermiogram and CFTR genotype in patients with bilateral agenesis of the vas deferens (In French)]. Prog Urol 1998;8(3):370—6.Weiske WH, Salzler N, Schroeder-Printzen, Weidner W. Clinical findings in congenital absence of the vasa deferentia. Andrologia 2000;32(1):13—8. DOI: 10.1046/j.1439-0272.2000.00093.x.Weiske WH, Salzler N, Schroeder-Printzen, Weidner W. Clinical findings in congenital absence of the vasa deferentia. Andrologia 2000;32(1):13—8. DOI: 10.1046/j.1439-0272.2000.00093.x.

The authors declare that there are no conflicts of interest present.